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    轉化實驗中,應選擇什么PCR酶?

    發(fā)布時間: 2022-06-08  點擊次數: 1526次

    轉化實驗中,應選擇什么PCR酶

    1. Taq酶
    2. 高保真酶


    這取決于你的克隆方案,是用平末端還是粘性末端。

    如果后續(xù)克隆用平末端連接,可以使用高保真酶,產生的末端就是就平末端,進行平末端連接。

    如果后續(xù)克隆用粘性末端,使用普通的Taq酶就可以了。Taq會在產物末端多帶一個A尾巴,對應的載體是帶T尾巴的T載體。

    如果在引物設計上,在PCR產物末端引入一些酶切位點序列,那么尾巴就會更長。加入尾巴時應考慮目的基因插入載體的方向,設計酶切位點序列尾巴。如果尾巴設計反了,插入的目的基因也是反方向的,就無法起效。



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