香港特级三a毛片免费观看,免费a级毛片出奶水,两个奶头被吃高潮视频,久久综合九色欧美综合狠狠

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 氨基酸代謝標記實驗

    氨基酸代謝標記實驗

    發(fā)布時間: 2022-03-10  點擊次數(shù): 1257次

    原理

    在含有放射性標記氨基酸的培養(yǎng)基中,短期培養(yǎng)細胞(<30min)對蛋白質(zhì)進行脈沖標記。


    材料與儀器

    37℃ 細胞懸液 [35S]標記L-甲硫氨酸(>800 Ci/mmol)/[35S]標記蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物
    PBS(冷凍) 37℃ 脈沖標記培養(yǎng)基
    配有液體同位素垃圾閥門的真空吸氣器


    步驟

    1. 室溫融化 [35S] 標記甲硫氨酸,并用預熱的(37℃)脈沖標記培養(yǎng)基制備 0.1~0.2 mCi/ml 的工作溶液。


    2. 室溫下 300 g 離心 5 min,獲得懸液中 0.5 × 107~2 × 107 細胞。用 10 ml 預熱的脈沖標記培養(yǎng)基洗細胞。室溫下 300 g 離心 5 min, 吸棄上清。輕柔敲打試管底部使細胞重懸并再洗一次。


    3. 用預熱脈沖標記的培養(yǎng)基重懸細胞,使其濃度為 5 × 106/ml。在 37℃ 水浴中溫育 15 min 以去掉細胞內(nèi)的甲硫氨酸。定時顛倒試管來使細胞重懸。


    4. 室溫下 300 g 離心 5 min,吸棄上清。用 2 ml [35S] 標記甲硫氨酸的工作溶液(見步驟 1)重懸細胞,轉(zhuǎn)移至干凈 15 ml 離心管中。蓋緊蓋子。在 37℃ 水浴中溫育 10~30 min, 不時輕柔顛倒試管或振蕩使細胞重懸。


    5. 4℃、300 g 離心 5 min,吸棄上清。用 10 ml 冰預冷的 PBS 輕柔重懸并再次離心。


    6. 可選:通過三氯乙(yi)酸(TCA)沉淀來測定標記物的摻入量(見輔助方案)。


    7. 如果細胞沉淀不馬上使用的話,可以置于冰上幾小時或 80℃ 保存幾天。分析前冰上融化細胞沉淀。


    注意事項

    1. 在標記過程中,揮發(fā)性的含有[35S]標記的化合物可能會釋放,含有[35S]標記甲硫氨 酸的培養(yǎng)基應保存在密閉緊蓋的試管中,用前置于37°C水浴。在37°C不能超過60 min。

    2. 在大多數(shù)情況下,冷凍細胞不會影響蛋白質(zhì)的生物化學特性,但是在用去污劑溶解后再凍融細胞 抽提物可引起多亞單位復合物的解離或標記蛋白質(zhì)降解。


    常見問題

    1. 實驗材料中的細胞懸液可以選擇如 Jurkat、RBL、K562、BW5147、T 和 B 細胞雜交瘤等,要求是生長于潮濕、37℃、5% 032溫箱中或從組織中制備(如淋巴細胞)。

    2. 脈沖標記不會使培養(yǎng)基中的標記物*喪失,因此標記混合物可以重復使用。收集標記的培養(yǎng) 基,小心地用0.45 μm的濾器濾過。細胞標記前后通過閃爍記數(shù)標記混合物來估計未摻人放射活 性的百分比。-20°C冷凍條件下標記的混合物可以保存2個月。


    以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

     

    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。


產(chǎn)品中心 Products
久久久久夜夜夜精品国产| 久精品国产欧美亚洲色AⅤ大片| 人妻丰满熟妇aⅴ无码| 亚洲色成人网站www永久四虎| 99国产精品自在自在久久| 亚洲精品无码久久久久a片苍井空| 国内女人喷潮完整视频| 少妇AV一区二区三区无码| 国产精品扒开腿做爽爽爽视频 | 亚洲V欧美V国产V在线观看| 特黄A片在线播放免费麻婆豆腐| 中文字幕精品久久久久人妻| 九九精品99久久久香蕉| 欧美rapper潮水抽筋| 在线视频免费观看www动漫| 亚洲 暴爽 AV人人爽日日碰 | 国产成人高清精品免费软件| 中文字幕AⅤ人妻一区二区| 精品久久久久精品亚洲av | 善良的小峓子hd完整视频中文| 亚洲av不卡无码国产| 久久69国产精品久久69软件| 久久精品国产一区二区三区不卡| 免费国产黄网站在线观看可以下载| 无码av久久久久久久久| 久久人妻av无码中文专区| 2017亚洲天堂最新地址| 美腿丝袜视频| 中文字幕丰满伦子无码| 亚洲GV天堂无码男同在线观看| 欧美做爰又粗又大免费看| 99久久久无码国产精品免费砚床| 亚洲成AV人片在线观看无| 欧美一区二区三区成人片在线| 亚洲人成无码网站久久99热国产| 4399在线观看韩国电影| 丰满熟妇乱又伦精品| 国产又黄又爽又色的免费视频| 日产国产精品亚洲系列| 中文av人妻av无码中文| 欧美熟妇brazzers|